光照培養箱具有超溫和傳感器異常保護功能，保障儀器和樣品安全；選配全光譜的植物生長燈，有利于植物的生長，提高抗病性。具有掉電記憶、掉電時間自動補償功能；恒溫控制系統，反應快，控溫精度高。

1.1材料

       實驗所需偽魚腥藻( FACHB-1277)購自中科院水生生物研究所淡水藻種庫,用BG11培養基培養，經實驗室擴大培養7 d后用于實驗.實驗前分別取一定體積的藻液以 5 000 r/min的速度離心10 min,棄掉上清液,用15 mg/L的碳酸氫鈉溶液洗滌后離心，重復3次，用無菌水稀釋接種于BG11培養基內，以BG11 培養基為參比，初始接種濃度為ODs≈0.02[17].

1.2實驗設置

       實驗采用一次性培養法，在500 mL錐形瓶中加人300 mL偽魚腥藻藻液,在5個不同150L光照培養箱中培養，光照強度依次為500,1 000,1 500,2 000，25001x,每個實驗組設置3個平行樣，光暗比為12 b:12h,溫度為25 C.為保證每個實驗組光照均勻，每天定時手動搖瓶3次，并隨機交換錐形瓶位置.實驗所用所有玻璃器皿均經121 C高溫滅菌30 min后使用

1.3參數測定

       以18 d為實驗周期，每天采集5 mL樣品用分光光度法測定0D6s, 用浮游植物分類熒光儀(PHYTO-PAM WALZ)測定葉綠素a含量(Chl a)及光合活性參數，具體包括最大光系統II(PSI)的光能轉換F/F_,最大相對電子傳遞速率TETRme,快速光曲線初始斜率at,半飽合光強1.按下式計算藻類比增長速率:μ= ln(N1/N18)/T.式中:N和Nis分別為第1天和第18天的ODas,T為培養時間。

       實驗結束時按照文獻方法測定類胡蘿卜素質量濃度.取藻液5 mL,以9000 r/min轉速離心15min,去掉上清液，加入80%丙酮在4C暗處提取24 h,再次離心后用紫外可見分光光度計在663 ,645和450 nm3個波長下測定上清液的吸光值，利用如下公式計算得出類胡蘿卜素的質量濃度。定義類胡蘿卜素質量濃度與葉綠素a含量的比值為類胡蘿卜素相對質量分數.
Pcarotenoids(mg/L) =4.1 x A450-0.553 x A663+0.118 x A645 

2結果分析

2.1光照強度對偽魚 腥藻生長的影響

       150L光照培養箱不同光照強度下偽魚腥藻Chl a的質量濃度變化如圖1所示，可以看出，在光照強度為1500 lx時，偽魚腥藻的生長狀況最好,第18天時Chla質量濃度可達4 151. 16 μg/L;當光照強度低于1 500 lx時，偽魚腥藻的生長趨勢隨光照強度下降而逐漸減慢,1 000和500 Ix光強組第18天偽魚腥藻的Chl a質量濃度分別為3 076. 13和1 914.37 μg/L;當光照強度高于1 500 Ix時,隨著光照強度的升高，偽魚腥藻的生長趨勢也會減緩,2 000和2 500 lx光強組第18天偽魚腥藻的Chl a質量濃度分別為3 661. 82和3 321. 88 μg/L.5個光強組應用OD計算得到的藻類生長比增長速率如圖2所示.將光照強度按照偽魚腥藻比增長速率從高到低排列依次為:1 5001x,1 000 lx,2 000 lx,2 500 Ix和500 lx.最高比增長速率為0.199 d-', 比較低比增長速率為0.154 d-1.

       對Chl a質量濃度和OD5進行單因子方差分析發現，各光強組間存在顯著差異(P<0.01),但進一-步進行Dunnett多重比較，發現只有500Ix光強組顯著低于其他各光強組，其他光強組之間差異不顯著(P>0.05).

       將Chla質量濃度和OD665與光照強度進行Pearson相關分析，結果如表1所示，第3~9天，Chl a質量濃度與光照強度呈現了顯著正相關關系(P< 0.05) ,相關系數為0.891 ~0.955，第11天開始,Chl a質量濃度與光照強度不再顯著相關;0Dus同樣在第3~9天與光照強度呈現了顯著正相關關系,且第3-7天為極顯著正相關(P<0.01).

2.2光照強度對偽 魚腥藻光合活性的影響

       150L光照培養箱不同光照條件下偽魚腥藻最大光能轉換Fv/Fm的變化，可以看出，Fv/Fm總體上量先上升后下降的趨勢,1 500 lx、2 000 Ix和2 5001x 3組在開始第1 ~3天的上升趨勢基本致,之后在第4 ~5天同時出現了下降趨勢，但1 500 Ix組在第5天之后繼續上升至第9天達到了峰值0.45,第10-18天量現波動下降和上升的趨勢;2000和2 500 Ix組則在第3天后總體呈現持續下降趨勢,2 500 Ix組在第13天下降至比較低0.13,低于初始值0.25 :500和1 0001x組F/F的變化趨勢較為類似，開始的上升速度慢于高光強組，但始終保持上升趨勢至第9天，500和1 000 Ix組Fv/Fm值分別達0.38和0.42,隨后緩慢下降，至第18天仍高于2000和2 500 lx光強組.對比而言，低光強組(500,1 000 lx)偽魚腥藻F/F值的波動比高光強組(2000,2500lx)小.表1中的相關分析結果顯示偽魚腥藻的F/F_值僅在第3天與光照強度呈顯著正相關(P<0.05),第11天與光照強度呈極顯著負相關(P<0.01),其余時間無明顯相關性.

       不同的150L光照培養箱光照條件下偽魚腥藻最大相對電子傳遞速率rETRmax的變化.低光強組(500,1000 lx)偽魚腥藻的rETRmax總體呈緩慢上升趨勢，變化較為平穩;1500 lx組偽魚腥藻的rETRmax第1~5天快速上升至峰值，隨后緩慢下降;高光強組(2000,2500 lx)偽魚腥藻的rETRmax 則呈現波動下降趨勢，特別是2 500 lx組，自第3天開始持續下降;第9天后，各光強組偽魚腥藻的rETRmax值相對差異保持穩定，從高到低排列依次為500 lx,1 000 lx,1 500 lx,2000lx,2500lx.相關分析結果顯示偽魚腥藻的rETRmax在第3天與光照強度呈極顯著正相關( P <0.01)，第11~17天呈顯著負相關(P<0.05),其余時間無明顯相關性

       各光照強度下，偽魚腥藻快速光曲線的初始斜率a變化如圖5所示.與TeTRmar的變化趨勢相似，2 500 k光強組偽魚腥藻的a值在初始第1 ~3天高于其他組,之后開始下降，降幅明顯;其余4組偽魚腥藻的a值均在第1 ~5天呈現快速上升趨勢,峰值高于2 500 k光強組，之后下降，下降幅度隨光照強度的增加而增大.相關分析結果顯示，偽魚腥藻的a值在第3天與光照強度呈顯著正相關(P<0.05)，在第7-17天與光照強度呈顯著負相關，其中第11和15天為極顯著負相關(P<0.01).

       偽魚腥藻在150L光照培養箱的各光照強度下的半飽和光強1基本在600~1 000 umol/( m·s)波動，總體上隨光照強度的升高而增大，如圖6所示，相關分析結果顯示，偽魚腥藻的1值從第7天開始與光照強度顯著正相關，其中第7和11天為極顯著正相關(P <0.01).2.3光照強度對偽魚腥藻色素比例的影響

       培養結束時不同光照強度下偽魚腥藻類胡蘿卜素與葉綠素相比的相對質量分數.該值隨光照強度的升高而逐漸增大,2500 lx光強組偽魚腥藻類胡蘿卜素的相對質量分數是500 Ix光強組的1.44倍.

4結論

       1)偽魚腥藻的最適生長再150L光照培養箱的光照強度為1 500 Ix,較為適應的光照強度范圍為1000~2 000 lx,將光強組按比增長速率從高到低順序排列依次為1500 lx,1 000 lx,2 000 lx,2 500 lx和500 Ix.

       2)偽魚腥藻的光合活性受光照強度影響顯著，培養一段時間后，光合速率和光能利用與光照強度顯著負相關，第11天相關系數分別為-0.939(P <0.05)和-0.978(P <D.01)，半飽和光強與光照強度顯著正相關,第11天相關系數為0.976(P<0.01).

       3)與其他藻類相比，偽魚腥藻屬于低光照強度耐受型藍藻,且具備自身調節機制應對光照不足或光照過強，易于在光照不足或光強波動較大的水體中占據優勢.

       4)偽魚腥藻的暴發相對不易受水深和光強的限制，不宜采用垂向擾動或遮光的抑藻措施對其進行控制.

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